Recuento de plaquetas en frotis sanguineo (08-01-15)

Justificación de la técnica y metodología utilizada

Las plaquetas constituyen el elemento forme mas pequeño de la sangre.
El recuento de plaquetas consiste en la determinación del numero de plaquetas presentes en un volumen determinado de sangre.
El recuento de plaquetas puede realizarse, de forma aproximada, contando estas en varios campos de una extensión sanguínea y observándola al microscopio. De forma mas exacta, también se puede llevar a cabo el recuento de plaquetas mediante la utilización de una cámara de recuento, o mejor aun, con contadores electrónicos de células.
El recuento de plaquetas realizado mediante frotis sanguíneo permite también observar la morfología de los trombocitos.

Identificación de la muestra utilizada

Sangre venosa o capilar

Material utilizado

El material que he utilizado para esta practica es el siguiente:

• Portaobjetos
• Capilar
• Microscopio

Los reactivos que he utilizado para esta practica son:

• Panoptico rápido
• Aceite de inmersión

La muestra que he utilizado para esta practica es:

• Sangre venosa

Secuenciación y procedimiento seguido

1. Realizamos la extensión de sangre capilar
2. Hacemos un frotis sanguíneo
3. Teñimos con panóptico rápido y enjuagamos, una vez seca la extensión, con agua destilada
4. Observamos la extensión al microscopio
5. Elegimos una zona de la preparación sanguínea en la cual las células no estén superuestas
6. Contamos el numero de plaquetas en 10 campos microscópicos
7. Realizamos el calculo medio de las plaquetas contadas

Descripción y registro de los resultados obtenidos

Para cuantificar, de forma aproximada, aplicamos la siguientr formula:
PLT/mm3=PLT/Cx20.000

PLT/mm3= numero de plaquetas por mm3 de sangre
PLT/C= Media del numero de plaquetas contadas en varios capos microscópicos, que en este caso son 10
Plaquetas contadas:
Campo 1 = 52
Campo 2 = 40
Campo 3 = 42
Campo 4 = 45
Campo 5 = 40
Campo 6 = 39
Campo 7 = 45
Campo 8 = 48
Campo 9 = 50
Campo 10 = 52
Total = 453

PLT/mm3 = 453/10 x 20.000= 906.000 plaquetas por mm3

El resultado que he obtenido es muy alto, lo que significa que hay una trombocitosis, que los valores normales están entre 130.000 y 400.000 plaquetas por mm3

Aplicación del control de calidad

• Para realizar un buen conteo de plaquetas, hayq eu cambiar el campo según indicaciones para no contarlas dos veces.
• También seria conveniente realizar dos estudios diferentes de la misma muestra para confirmar el resultado.
• Realizar la observación en dos microscopios distintos

Normas de prevención de riesgos laborales

• Uso de guantes y bata
• Llevar el pelo recogido
• No comer, beber o fumar en el laboratorio
• Uso correcto del microscopio
• Lugar de trabajo limpio y ordenado

Cuidado del medioambiente

El material utilizado se puede lavar bien en el fregador, asegurándose de que no se dejan restos de jabón

Observaciones, comentarios y conclusiones

Como me a dado un recuento tan alto, se debería de volver a contar las plaquetas de esta persona y hacer un análisis para comprobar con mayor exactitud el numero de plaquetas por mm3 de sangre.

Hoja de ttabajo

1º En condiciones normales, ¿cuántas plaquetas por campo microscópico hay en una zona de un frotis sanguíneo donde los eritrocitos no están superpuestos?

Hay un número de plaquetas aproximado por campo de 5 a 25 unidades.

 

Deteccion de crioglobulinas (11-01-15)

Justificación de la técnica y metodología utilizada

Las crioglobulinas son proteínas anormales.

En el laboratorio, las crioglobulinas salen de la sangre y forman cristales cuando la muestra sanguínea se enfría por debajo 37º C

Las crioglobulinas vienen en tres tipos diferentes, pero en el 90% de los casos la causa es la hepatitis C. La enfermedad en la cual se encuentran las crioglobulinas se denomina crioglobulinemia.

Identificación de la muestra y de los controles efectuados

Sangre venosa coagulada

Material utilizado

El material que he utilizado para esta practica es:

• Pipeta pasteur
• Tubo de ensayo
• Nevera
• Baño de agua
• Capilar de microhematocrito no heparinizado
• Plastilina
• Centrifuga de hematocrito
• Una regla

La muestra que he utilizado es:

• Suero transparente obtenido de sangre coagulada

Secuenciación y procedimiento seguido

1. Depositar el suero problema en un tubo de ensayo
2. Colocar el tubo que contiene el suero en la nevera, de forma que esté a una temperatura comprendida en tre los 4ºC y los 6ºC
3. Examinar el tubo a los 30 minutos y después, cada dia, durante 6 días

Descripción y registro de los resultados

Si aparecen partículas blanquecinas en el suero, este a de ser incubado a 37ºC
En el caso de que la prueba sea positiva, puede realizarse una semicuantificacion de las crioglobulinas presentes en el suero, mediante la determinación del criocrito
El criocrito se mide llenando un capilar sus 3/4 partes, se deja enfriar a 4-6ºC hasta que aparezca precipitación de las crioglobulinas, se centrifuga y se miden las fracciones del capilar con una regla.

El criocrito es la relación existente entre el volumen ocupado por el precipitado de crioglobulinas y el ocupado por el suero total, expresado en forma de porcentaje.

Aplicación del control de calidad

Para un control de calidad correcto la practica se debería hacer dos veces y observar si los resultados son los mismos

Normas de prevención de riesgos laborales

             1.      Uso de guantes y bata en el laboratorio.

2.      Llevar el pelo recogido si se tiene largo.

3.      No comer, beber o fumar en el laboratorio.

4.      Lugar de trabajo limpio y ordenado.

Cuidado del medioambiente

Para el cuidado del medioambiente debemos lavar el tubo de ensayo después de haber terminado la practica con lejía para desinfectar bien

Observaciones, comentarios y conclusiones

En nuestra practica no se observan crioglobulinas.

Determinacion del indice de lobularidad (08-01-15)

Justificación de la técnica y metodología utilizada

Los índices leucocitarios son unos parámetros que sirven para evaluar el grado de madurez de los leucocitos, y en concreto, de los neutrófilos que se encuentran en la sangre periférica.
En la elaboración de estos índices no se tienen en cuenta las formas juveniles y maduras de los eosinófilos, debido a su mucha menor presencia en sangre periférica, en comparación con los neutrófilos.

Hay dos formas de llevar a cabo esta valoración: la de Schilling y la de Arneth.

El recuento de Arneth, consiste en contar el numero de lobulaciones que tiene una cantidad determinada de neutrófilos y, seguidamente, calcular el numero de lobulos que hay por cada neutrófilo.

Esto suele hacerse con automatizadores, pero también se puede hacer manual.

Arneth, agrupo los neutrofilos atendiendo al numerode lobulaciones de su nucleo, en 5 tipos:

• Tipo I: nuetrofilos con un nucleo no segmentado, es decir, sin lobulaciones
• Tipo II: neutrófilos con un nucleo dividido una vez, es decir, con 2 lobulos
• Tipo III: neutrófilos con un nucleo dividido dos veces, es decir, con 3 lobulos
• Tipo IV: Neutrófilos con un nucleo dividido tres veces, es decir, con 4 lobulos
• Tipo V: Neutrófilos con un nucleo dividido cuatro veces, es decir, con 5 lobulos.

Conociendo el numero de neutrófilos de cada tipo de Arneth, que hay en la sangre periférica, se puede calcular el numero de lobulos que tiene una determinada cantidad de neutrófilos y, por tanto, es posible saber el numero de lobulos por neutrófilo

Identificación de la muestra utilizada

La muestra que hemos utilizado es sangre capilar

Material utilizado

El material que he utilizado para realizar esta practica es el siguiente:

• Lanceta
• Gasas
• Capilar
• Portaobjetos
• Microscopio

Los reactivos que he utilizado para realizar la practica son los siguientes:

• Alcohol
• Panoptico rápido

La muestra que he utilizado para realizar esta practica es:

• Sangre capilar

Secuenciación y procedimiento seguido

1. Extraer sangre del dedo con un capilar
2. Hacer un frotis sanguíneo lo mas fino posible
3. Teñir con panóptico rápido y después lavar la extensión con agua destilada
4. Mirar al microscopio con aceite de inmersión
5. Observar los neutrófilos y contar sus lobulaciones
6. Clasificar los neutrófilos según Arneth
7. Terminar el recuento cuando se hayan observado 100 neutrófilos

Descripción y registro de los resultados obtenidos

Una vez que se han contado los neutrófilos, se cuantifican las lobulaciones que hay presentes en elos y se realiza la siguiente formula:
        NL
IL= -----
        NN      

Donde:
IL: es el índice de lobularidad
NL: es el numero de lobulos contados
NN: es el numero de neutrófilos

Según los resultados podemos obtener una desviación a la derecha o una desviacion a la izquierda.
La desviación a la izquierda, puede acompañarse de neutrofilia o de neutropenia.
La desviación a la izquierda con neutrofilia es típica de muchas infecciones agudas, como por ejemplo, apendicitis,sepsis, etc.
La desviación a la izquierda con neutropenia es característica de otras infecciones, como por ejemplo, fiebre tifoidea, brucelosis, etc.
La desviación a la derecha puede dar en varios procesos patológicos, entre los que destacan las anemias megaloblasticas. Curiosamente esta alteración se produce también en la agonía.
Los resultados que he obtenido en esta practica son:

De tipo I hay 0
De tipo II hay 6
De tipo III hay 18
De tipo IV hay 1
De tipo V hay 0
IL=25/5=5

Aplicación del control de calidad

1. Extraer de forma adecuada la muestra
2. Preparar correctamente la muestra, esta ha de ser bastante fina
3. Realizar la visualización de forma adecuada
4. Uso correcto del microscopio
5. Visualización en, al menos, dos microscopios para validar los resultados

Normas de prevención de riesgos laborales

• Uso de guantes y bata
• Llevar el pelo recogido
• No comer, ni beber, ni fumar en el laboratorio
• Uso correcto del microscopio
• Lugar de trabajo limpio y ordenado
• Desechar la lanceta y el capilar en el contenedor amarillo

Cuidado del medio ambiente

En esta practica no se utilizan productos químicos agresivos con el medio ambiente por lo que se puede lavar con normalidad, utilizando lejía para desinfectar ya que contiene sangre

Observaciones, comentarios y conclusiones

Hoy en dia el indice de lobularidad se hace, como otras pruebas, en autoanalizadores

Hoja de trabajo

1º ¿Cuántos tipos de neutrófilos hay según Arneth?

Arneth, agrupó los neutrófilos atendiendo al número de lobulaciones de su núcleo, en 5 tipos:

·         Tipo I: neutrófilos con un núcleo no segmentado, es decir, sin lobulaciones.

·         Tipo II: neutrófilos con un núcleo dividido una vez, es decir, con 2 lóbulos.

·         Tipo III: neutrófilos con un núcleo dividido 2 veces, es decir, con 3 lóbulos.

·         Tipo IV: neutrófilos con un núcleo dividido 3 veces, es decir, con 4 lóbulos.

·         Tipo V: neutrófilos con un núcleo dividido 4 veces, es decir, con 5 lóbulos.

2º ¿Qué tipo de desviación hay si el IL es igual a 2,5?

Si el IL es igual a 2,5, es un valor normal, ya que está comprendido entre 1,9 y 3. Por lo tanto no hay ninguna desviación.

3º ¿De qué enfermedades es típica la desviación a la izquierda con neutrofilia?

La desviación a la izquierda con neutrofilia es típica de muchas infecciones agudas, como por ejemplo, apendicitis, sepsis, etc

Estudio de un concentrado de leucocitos (08-01-15)

Justificación de la técnica y metodología utilizada

En algunas circunstancias, esta indicada la obtención de un concentrado de leucocitos, entre las que destacan:

• Obtención y estudio microscópico de células patológicas en una leucopenia
• Obtención de células en una leucopenia para la realización de pruebas citoquimicas
• Obtención de células para la búsqueda de corpúsculos de Barr, que es la condensación del material genético inactivado de un cromosoma X

Al centrifugar la sangre anticoagulada a una velocidad y a un tiempo adecuados se obtienen tres capas o fracciones:

• Una capa inferior, de color roja y donde se encuentran los globulos rojos
• Una capa intermedia, de color blanco y escaso espesor, donde se encuentran los leucocitos y las plaquetas, denominada capa leucoplaquetaria
• Una capa superior, transparente y de color ambarino, que es el plasma

La observación y estudio de la placa intermedia, permite el estudio de numerosos leucocitos de todos los tipos

Identificación de la muestra utilizada

Sangre venosa anticoagulada con citrato sódico

Material utilizado

El material que he utilizado en esta practica es el siguiente:

• Tubos de centrifuga
• Pipeta Pasteur de vidrio
• Portaobjetos
• Centrifuga
• Microscopio

Los reactivos que he utilizado son los siguientes:

• Panoptico rápido
• Aceite de inmersión

La muestra que he utilizado es:

• Sangre venosa anticoagulada con citrato sódico

Secuenciación y procedimiento seguido

1. Depositar sangre en un tubo para centrifuga
2. Centrifugar la sangre a 1500 rpm durante 30 minutos
3. Una vez separada la sangre en sus tres fracciones retirar el plasma con la ayuda de una pipeta Pasteur de vidrio
4. Con otra pipeta Pasteur de vidrio recoger parte de placa leucoplaquetaria con cuidado de no coger eritrocitos
5. Depositar y extender varias gotas en un porta como si fuera un frotis
6. Teñir la muestra con panóptico rápido y una vez teñida enjuagar con agua destilada

Descripción y registro de los resultados obtenidos

La observación microscópica del frotis preparado, a partir de la placa leucoplaquetaria, permite el estudio de numerosos leucocitos de todos los tipos y, también, facilita la visualización de multiples plaquetas

Aplicación del control de calidad

• Retirar de forma adecuada el sobrenadante e intentar coger solo la capa intermedia
• Asegurese del buen funcionamiento tanto de la centrifuga como del microscopio
• Realizar una buena extensión
• Seguir el procedimiento adecuado en la tinción
• Realizar la observación, en al menos, dos microscopios

Normas de seguridad de prevención de riesgos laborales

• Uso de guantes y bata
• Llevar el pelo recogido
• No comer, beber o fumar en el laboratorio
• Uso correcto de la centrifugadora y del microscopio
• Lugar de trabajo limpio y ordenado
• Conservar el producto de la tinción en los envases adecuados y bien cerrados

Cuidado del medioambiente

Puesto que los reactivos de esta practica son de poca cantidad, se pueden desechar por el fregador dejando correr el agua

Observaciones, comentarios y conclusiones

En la muestra se pueden observar varios tipos de globulos blancos como monocitos o linfocitos.

Hoja de trabajo

1º ¿Cómo se llama a la condensación del material genético inactivado de un cromosoma X?

Corpúsculo de Barr

2º ¿Qué otro nombre recibe la capa leucoplaquetaria?

Recibe el nombre de Baffy Coat

3º Tras centrifugar la sangre, ¿En qué capa se sitúan los hematíes?

Los hematíes se sitúan en la capa inferior por el efecto de la gravedad.

 

Fórmula leucocitaria (01 de Diciembre de 2014)

Justificación de la técnica y metodología utilizada
La fórmula de leucocitos o leucocitaria o recuento diferencial leucocitario (RDL )mide el porcentaje presente de cada tipo de leucocitos en el total de glóbulos blancos. 

Identificación de la muestra y de los controles efectuados
 Sangre capilar

Material utilizado

 El material que he utilizado es el siguiente:

• Lancetas
• Gasas
• Papel
• Lapiz
• Microscopio

Los reactivos que he utilizado son:

• Alcohol
• Aceite de inmersión

La muestra utilizada es:

• Sangre

Secuenciación y procedimiento seguido

1.      Extraer la sangre y preparar una extensión o frotis sanguíneo.

2.      Teñir con una tinción habitual. En este caso se ha elegido la tinción de Panóptico rápido.

3.      Preparar el microscopio con el condensador alto y el diafragma abierto.

4.      Comprobar que la preparación es buena y elegir una zona donde los hematíes no estén superpuestos y los leucocitos se encuentre uniformemente distribuidos.

5.      Enfocar la zona con el objetivo de inmersión (100 x)

6.    Observar la zona elegida haciendo un recorrido en forma de almenas

Descripción y registro de los resultados
Las células que se cuentan, pueden anotarse mediante un registrado automático de células o con lápiz y papel.

El registrador automático, consiste en un aparato con unas teclas, las cuales representa a un tipo de leucocito y hace una anotación cada vez que se presiona. Cuando el número de anotaciones llega a 100, suena una alarma.

Si el recuento se hace con lápiz y papel, se dibujan unas columnas que representan cada tipo de leucocitos y se traza una raya en la columna correspondiente cada vez que se ve un leucocito.

Cuanto mayor es el número de leucocitos contados, la determinación es más exacta. Sin embargo, en la práctica, solo se cuentan 100 leucocitos o,  como máximo, 200.

Si se encuentra un mayor número de linfocitos que de neutrófilos, en el adulto, o más de un 10% de eosinófilos o más de un 12% de monolitos, el RDL se hace contando 200 leucocitos y dividiendo luego el resultado entre 2.
Si se conoce el WDC de la sangre, se puede calcular el número de cada uno de los tipos de leucocitos que está presente en un mm³ de sangre.
Los resultados que yo he obtenido son los siguientes:
Neutrófilos cayados -> he contado 9, el porcentaje seria de 9%
Neutrófilos segmentado -> he contado 66, el porcentaje seria de 66%
Linfocitos -> he contado 12, el porcentaje seria de 12%
Eosinófilos -> he contado 1, el porcentaje seria de 1%
Basófilos -> he contado 4, el porcentaje seria de 4%

Aplicación del control de calidad
Para asegurar la calidad de los resultados, habría que elegir una muestra adecuada y realizar de forma correcta la tinción.
También hay que realizar la visualización y el recuento en, al menos, dos microscopios diferentes.

Normas de prevención de riesgos laborales

1.      Uso de guantes y bata en el laboratorio.

2.      Llevar el pelo recogido si se tiene largo.

3.      No comer, beber o fumar en el laboratorio.

4.      Lugar de trabajo limpio y ordenado.

5.      Mantener una posición corporal correcta durante la visualización de la muestra.

Cuidado del medio ambiente
Puesto que los reactivos de esta práctica son de poca cantidad, el porta utilizado se puede lavar con normalidad en el fregador.
El resto de reactivos, utilizados en la tinción, se guardan en sus cubetas correspondientes, en el armario de Hematología.

Observaciones, comentarios y conclusiones
Para poder valorar cuáles son las posibles causas de una alteración de los glóbulos blancos en los análisis de sangre, debe tenerse en cuenta el recuento total y el análisis del resto de las células sanguíneas, la respuesta a las preguntas del médico  al  paciente buscando otros signos o síntomas, así como repetir el estudio sanguíneo a las 2-4 semanas para ver la evolución.
Las alteraciones de los glóbulos blancos pueden ser de su forma  (tamaño y forma) o de su funcionamiento, sobre todo los neutrófilos y los linfocitos. En muchos casos, se trata de enfermedades hereditarias que se sospechan en pacientes con infecciones repetidas. También se producen en algunas infecciones, como la mononucleosis infecciosa, en reacciones ante algunos medicamentos, y en anemias y neoplasias.
La alteración por aumento en el número de leucocitos, se denomina leucocitosis, y según el tipo que está aumentado, se habla de neutrofilia, de linfocitosis y de eosinofilia. Se denomina  leucopenia a la  disminución en el recuento de glóbulos blancos.

Hoja de trabajo
1. ¿Con que objetivo se observan los leucocitos cuando se determina una formula leucocitaria?
Con el de 100x

2. ¿Cómo es el recorrido que se describe en la observación leucocitaria?
En almena o greca

3. ¿Cuándo se han de observar al menos 200 leucocitos?
Cuando se encuentran mas linfocitos que neutrófilos o mas del 10% de eosinófilos o mas de 12% de monocitos

4. Si de 100 leucocitos observados, 20 son linfocitos y el WBC es igual a 7000 leucocitos/mm3 de sangre, ¿Cuál es el numero de linfocitos que hay en 1mm3 de sangre?

             7000x20
nº TL = ------------ = 1400 linfocitos/mm3 de sangre
                 100
5. ¿Cómo se llama el aumento de los monocitos?
Monocitosis