Estudio de un concentrado de leucocitos (08-01-15)

Justificación de la técnica y metodología utilizada

En algunas circunstancias, esta indicada la obtención de un concentrado de leucocitos, entre las que destacan:

• Obtención y estudio microscópico de células patológicas en una leucopenia
• Obtención de células en una leucopenia para la realización de pruebas citoquimicas
• Obtención de células para la búsqueda de corpúsculos de Barr, que es la condensación del material genético inactivado de un cromosoma X

Al centrifugar la sangre anticoagulada a una velocidad y a un tiempo adecuados se obtienen tres capas o fracciones:

• Una capa inferior, de color roja y donde se encuentran los globulos rojos
• Una capa intermedia, de color blanco y escaso espesor, donde se encuentran los leucocitos y las plaquetas, denominada capa leucoplaquetaria
• Una capa superior, transparente y de color ambarino, que es el plasma

La observación y estudio de la placa intermedia, permite el estudio de numerosos leucocitos de todos los tipos

Identificación de la muestra utilizada

Sangre venosa anticoagulada con citrato sódico

Material utilizado

El material que he utilizado en esta practica es el siguiente:

• Tubos de centrifuga
• Pipeta Pasteur de vidrio
• Portaobjetos
• Centrifuga
• Microscopio

Los reactivos que he utilizado son los siguientes:

• Panoptico rápido
• Aceite de inmersión

La muestra que he utilizado es:

• Sangre venosa anticoagulada con citrato sódico

Secuenciación y procedimiento seguido

1. Depositar sangre en un tubo para centrifuga
2. Centrifugar la sangre a 1500 rpm durante 30 minutos
3. Una vez separada la sangre en sus tres fracciones retirar el plasma con la ayuda de una pipeta Pasteur de vidrio
4. Con otra pipeta Pasteur de vidrio recoger parte de placa leucoplaquetaria con cuidado de no coger eritrocitos
5. Depositar y extender varias gotas en un porta como si fuera un frotis
6. Teñir la muestra con panóptico rápido y una vez teñida enjuagar con agua destilada

Descripción y registro de los resultados obtenidos

La observación microscópica del frotis preparado, a partir de la placa leucoplaquetaria, permite el estudio de numerosos leucocitos de todos los tipos y, también, facilita la visualización de multiples plaquetas

Aplicación del control de calidad

• Retirar de forma adecuada el sobrenadante e intentar coger solo la capa intermedia
• Asegurese del buen funcionamiento tanto de la centrifuga como del microscopio
• Realizar una buena extensión
• Seguir el procedimiento adecuado en la tinción
• Realizar la observación, en al menos, dos microscopios

Normas de seguridad de prevención de riesgos laborales

• Uso de guantes y bata
• Llevar el pelo recogido
• No comer, beber o fumar en el laboratorio
• Uso correcto de la centrifugadora y del microscopio
• Lugar de trabajo limpio y ordenado
• Conservar el producto de la tinción en los envases adecuados y bien cerrados

Cuidado del medioambiente

Puesto que los reactivos de esta practica son de poca cantidad, se pueden desechar por el fregador dejando correr el agua

Observaciones, comentarios y conclusiones

En la muestra se pueden observar varios tipos de globulos blancos como monocitos o linfocitos.

Hoja de trabajo

1º ¿Cómo se llama a la condensación del material genético inactivado de un cromosoma X?

Corpúsculo de Barr

2º ¿Qué otro nombre recibe la capa leucoplaquetaria?

Recibe el nombre de Baffy Coat

3º Tras centrifugar la sangre, ¿En qué capa se sitúan los hematíes?

Los hematíes se sitúan en la capa inferior por el efecto de la gravedad.