miércoles, 18 de marzo de 2015

Recuento de plaquetas con hemocitómetro (11-01-15)

Justificación de la técnica y metodología utilizada

Los trombocitos son células producidas por los megacariocitos en la médula ósea mediante el proceso de fragmentación citoplasmática, se encuentran unas 250 mil x mm3 , su vida media es de 9.5 días y tienen un papel muy importante en la coagulación.
Miden de 3-4 micras de diámetro, son redondeadas, se pueden observar con una tinción azul de cresil brillante, no tienen núcleo, pueden tener una forma esférica u ovalada y son muy frágiles.
El recuento de plaquetas  es la medida de concentración de plaquetas que circulan por la sangre y junto a los eritrocitos, leucocitos, concentración de hemoglobina, el valor de hematocrito y los índices eritrocitarios constituyen a hemograma, este es muy importante ya que las plaquetas desempeñan una función vital en la hemostasia.
Para el recuento en cámara de plaquetas, se diluye la sangre problema en un líquido apropiado y, posteriormente, se deposita en la cámara de recuento, donde se cuentan las células en alguno de los cuadrados de uno de los retículos.

Identificación de la muestra

La muestra en esta práctica es de sangre capilar y también puede ser venosa extraída recientemente y recogida con un tubo con EDTA

Material utilizado

El material que he utilizado para realizar esta practica es el siguiento:
  • Camara de Neubauer
  • Goma con boquilla
  • Pipeta de Thoma para globulos rojos
  • Cubreobjetos
  • Prepipeta
  • Microscopio
El reactivo utilizado es:
  • Liquido diluidor de plaquetas
La muestra utilizada es:
  • Sangre 
Secuenciación y procedimiento seguido
1.      Llenar la pipeta de Thoma hasta la marca 1.0 y limpiar la punta con una gasa
2.      Completar con el líquido de plaquetas hasta la marca 101 para tener una dilución de 1:100
3.       Se descartan las primeras 5 gotas y con la sexta gota se carga la cámara de Neubauer
4.      Después  se coloca la cámara de Neubauer en una caja Petri con papel filtro humedecido en agua para evitar la evaporación y se deja de 10 a 15 min
5.   Mirar al microscopio con el objetivo de 40x

Descripción y registro de los resultados obtenidos

Los trombocitos se observan como corpúsculos redondeados u ovalados, de tamaño muy pequeño y muy refringentes. Hay que procurar no confundirlos con leucocitos, restos eritrocitarios y, sobre todo, con partículas de polvo.
Para calcular el número de plaquetas por mm3 de sangre, se aplica la siguiente fórmula:
PLT/mm3 = P x V x D = P x 1.000
PLT/mm3 = número de plaquetas por mm3.
P = número de plaquetas contadas en 1 cuadrado grande.
V = corrección de volumen (10)
D = Corrección de dilución (100)
Si la cifra de plaquetas obtenida es, sospechosamente, muy reducida, se efectúa una dilución menor de la muestra y se cuentan los trombocitos depositados en varios cuadrados grandes.
Por el contrario, si la cifra de plaquetas obtenida es muy elevada, se efectúa una dilución mayor de la muestra.
Esto implica un ajuste de los cálculos necesarios para obtener el PLT/ mm3 y tiene por objeto el confirmar los resultados obtenidos.
En esta prueba he obtenido:
Total de plaquetas contadas: 737 plaquetas contadas
PLT/mm3 = P x V x D = P x 1.000          
PLT/mm3 = 737 x 1.000 = 737.000 plt/mm3
Los valores normales están entre 140.000 y 400.000 por mm3 de sangre 





Aplicación del control de calidad

Realizar la observación en dos microscopios diferentes y asegurarse de que el líquido diluyente está en perfectas condiciones de uso y realizar de forma correcta la dilución.

Normas de prevención de riesgos laborales
1.      Uso de guantes y bata en el laboratorio.
2.      Llevar el pelo recogido si se tiene largo.
3.      No comer, beber o fumar en el laboratorio
4.      Uso correcto del microscopio.
5.      Lugar de trabajo limpio y ordenado.
Cuidado del medioambiente
  • Los materiales utilizados se pueden limpiar con normalidad en el fregador del laboratorio.
  • Usar correctamente los contenedores
Observaciones, comentarios y conclusiones

Como me a dado un resultado muy alto debemos volver ha hacer la practica y volver a contar y ver lo que nos sale

Hoja de trabajo


1º ¿Qué tipo de pipeta diluidora se utiliza en el recuento de plaquetas?
En esta prueba se utiliza la pipeta de Thoma para glóbulos rojos.

2º ¿Qué funciones desempeña el líquido de dilución empleado?
Evitar la agregación y la adhesión de las plaquetas y las hace refringentes.

3º ¿Cuánto líquido de dilución se necesita para efectuar un ensayo?
Se necesita 1 ml.

4º. ¿Con qué se puede preparar una cámara húmeda?
Con una Placa Petri.

5º. ¿Con qué Objetivo se encuentran las plaquetas?
Con el de 40x

6º. ¿Cómo se aprecian los trombocitos en este recuento?
Refringentes
 

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