Recuento de hematies (20 de Noviembre de 2014)

Justificación de la técnica y metodología utilizada
El recuento de hematíes o RBC (Red Blood Count) consiste en una determinación del número de eritrocitos presentes en un volumen determinado de sangre, generalmente en un mm³ o µl
Para el conteo de eritrocitos, se usan métodos sistemáticos que son más rápidos y precisos, y los métodos manuales.
Todo método manual de recuento celular incluye 3 fases:

·         Dilución de la sangre

·         Muestreo de la sangre diluida en un volumen

·         Recuento de células en ese volumen

Una suspensión celular se caracteriza por presentar un número de partículas microscópicas dispersas en un fluido. Habitualmente será necesario determinar tanto la densidad de las células en la suspensión como el porcentaje de éstas que son viables. Para determinar la densidad de las células se emplean diferentes técnicas, desde la relativamente simple cámara de contaje celular de la que existen numerosas variantes, entre ellas la que utiliza la cámara de Neubauer
Para el conteo de eritrocitos, es necesario diluir la sangre con el líquido de Hayem, en una proporción exacta. Luego se examina en el microscopio con una cantidad pequeña colocada en la cámara de Neubauer, contando el número de elementos que se encuentran en el retículo de la cámara y mediante una operación se obtiene el número total.

Identificación de la muestra utilizada y de los controles efectuados
Sangre venosa anticoagulada

Material utilizado

El material que he utilizado para esta practica es el siguiente:

• Cámara de Neubauer
• Pipeta diluidora de Thoma
• Tubo de goma con boquilla de glóbulos rojos
• Prepipeta de cremallera
• Un cubreobjetos
• Un microscopio

Los reactivos utilizados son:

• Liquido de Hayem

La muestra utilizada es:

• Sangre

Secuenciación y procedimiento seguido

1. Situar el cubre sobre la cámara
2. Aspirar despacio la sangre hasta la señal de 1
3. Limpiar cuidadosamente el exterior de la pipeta con un algodón
4. Aspirar liquido de Hayem hasta la señal de 101
5. Desenganchar el tubo de goma de la pipeta y homogeneizar
6. Desechar las tres primeras gotas emitidas por la pipeta
7. Depositar la siguiente gota entre la cámara y el cubre
8. Dejar reposar la sangre diluida durante unos minutos
9. Enfocar el retículo con el objetivo de 40x

Descripción y registro de los resultados obtenidos
Para hallar el recuento de hematíes se utiliza la siguiente formula: RBC = Hx5x10xD
H = Hematíes contados en 5 cuadrados obtenidos
D = Factor de dilución
Yo he contado un total de 383 hematíes en los cinco cuadrados, asi que la formula seria:
RBC = 383x5x10x100 = 1915000 millones/mm3
Se considera normal un RBC comprendido entre los 4 y los 5,5 millines/mm3 en las mujeres y entre los 4,5 y los 6 millones/mm3 en los hombres

Aplicación del control de calidad
En la observación al microscopio de la muestra, esta debemos realizarla en varios microscopios para compararla y poder validarla. Debemos comprobar el buen funcionamiento de cada uno de los microscopios que se utilicen y manejarlos correctamente, siguiendo el protocolo de utilización

 

Normas de prevención de riesgos laborales

Las normas de prevención que debemos adoptar en esta práctica son:

-        Uso de bata y de guantes apropiados.

-        Si se tiene el pelo largo, llevarlo recogido.

-        Lavarse las manos antes y después de la práctica.

-        Los envases hay que dejarlos bien cerrados, guardados en un ambiente seco y a temperatura
         ambiente.

-        En caso de vertido accidental, recoger en seco y depositar en contenedores de residuos para su
          posterior eliminación de acuerdo con las normativas vigentes. Limpiar los restos con agua
          abundante.

-        Lavar adecuadamente la cámara de recuento.

-        Mantener el puesto de trabajo limpio y ordenado.

Cuidado del medio ambiente
 Desechar el cubreobjetos al contenedor biológico (contenedor amarillo)

Observaciones, comentarios y conclusiones
Hay algunas cámaras de Neubauer muy rayadas y en las que no se ve nada.
Se ven mejor los hematíes en una cámara de campo oscuro

Hoja de trabajo
1. ¿Qué se debe de hacer si el liquido de hayem contiene precipitados?
Se debe colar con la ayuda de un papel de filtro

2. ¿Cuál es el volumen de sangre diluida que hay sobre cada uno de los cuadrados pequeños donde se han contado los hematíes?
0,005x0,005x0,1 = 0,0000025