viernes, 12 de diciembre de 2014

Contaje de reticulocitos (27 de Noviembre de 2014)

Justificación de la técnica y metodología utilizada
Los reticulocitos son eritrocitos inmaduros que contienen, como su nombre indica, un retículo o red cromatínica formada por restos de ARN (ribosomas), mitocondrias y otros órganos celulares.
Tienen un tamaño de 8 a 9 µl de diámetro. Permanecen en médula ósea unos 2 0 4 días y después salen a sangre periférica, donde terminan el proceso de maduración en unas 24 horas.
Su cantidad en sangre periférica es un reflejo de la actividad eritropoyetina medular.
Podemos observar los reticulocitos al microscopio óptico mediante la tinción con colorantes vitales, como el azul de metileno o azul de cresil brillante. Estos colorantes dan lugar a la precipitación de los restos de ARN, y se observan cómo filamentos de color azul intenso en el interior de la célula.

Identificación de la muestra y de los controles efectuados
Sangre capilar

Material necesario
El material que he utilizado para realizar la practica es e siguiente:
  • Lancetas
  • Gasas
  • Portaobjetos
  • Tubos de hemolisis
  • Pipetas Pasteur
  • Baño de agua
  • Microscopio
Los reactivos que he utilizado son:
  • Alcohol
  • Azul cresil brillante
  • Aceite de inmersión
La muestra que he utilizado es:
  • Sangre
Secuenciación y procedimiento seguido

1. Preparación del colorante:
a.       Mezclamos 80 ml de solución salina y 20 ml de citrato sódico al 3 %. (este paso no se  hace ya que está preparado en la mezcla)
b.      Pasamos 1 g de azul de cresil brillante y se disuelve en la mezcla anterior.
c.       Filtramos la preparación antes de usarlo
 
2. Preparar dos extensiones para la tinción de los reticulocitos:
Se trata de una tinción supravital, es decir, se hace mientras las células están aún vivas.
a.       Para ello echamos tres gotas de la solución colorante en un tubo de hemólisis y otras tres gotas de sangre total previamente homogeneizada.
b.      Mezclamos suavemente y tapamos con papel parafilm. Introducimos en el baño de agua a 37 °C durante 5 minutos.
c.       Pasado este tiempo, volvemos a homogeneizar y tomamos una gota de la suspensión para depositarla en un porta.
d.      Realizamos una extensión y dejamos secar al aire.
 
 
Descripción y registro de los resultados obtenidos
Los hematíes se habrán teñido de color verde amarillento y los reticulocitos se diferencian porque presentan en su interior unos hilos finos de color azul.
Se deben contar 2000 hematíes en total.

 
Aplicación del control de calidad
 Para realizar el recuento reticulocitario hay que asegurarse de que los reactivos o colorantes están en perfecto estado, ya que si no, pueden precipitar y formas grumos o no teñir de forma adecuada la muestra.
Se han de preparar y contar dos muestras para evitar errores en las observaciones, así como realizarlas en microscopios diferentes
Normas de seguridad y prevención de riesgos laborales
1.      Realizar el procedimiento adecuado del baño. Tener cuidados con posibles riesgos eléctricos.
2.      Uso de guantes y bata en el laboratorio.
3.      Llevar el pelo recogido si se tiene largo.
4.      No comer, beber o fumar en el laboratorio.
5.      Lugar de trabajo limpio y ordenado
6.      Limpiar correctamente los portas, dejándolos después en la solución de acetona.
Cuidado del medio ambiente
En esta práctica, los portas utilizados para preparar las muestras se pueden lavar en el grifo y tirar el líquido en la garrafa.
Observaciones, comentarios y conclusiones
La determinación de los reticulocitos permite evaluar la producción eficaz de células rojas por la médula ósea. Su utilidad real es conocer la capacidad de respuesta de la médula en aquellos casos en los cuales hay disminución de las células rojas en sangre periférica y es necesario que la médula aumente su producción para así compensar el déficit de dichas células. Esta información es de fundamental importancia en el diagnóstico de anemias por falla en la producción (anemia aplásica) y por aumento en la destrucción (anemia hemolítica) 
Hoja de trabajo
1. ¿Qué son los reticulocitos?
Son hematíes inmaduros
2. ¿Qué tipo de tinción estamos utilizando?
Una tinción vital
3. ¿Por que hacemos la corrección del porcentaje de reticulocitos?
Por que existe una anemia con disminución en la cantidad de hematíes y se compensa con un aumento en el numero de reticulocitos y debemos corregir su valor en tato por ciento para poder considerarla real.


4. ¿Qué nos expresa el IPR?
Nos da un valor numérico de la estimulación hematopoyetica por encima de la actividad de la línea base normal 

No hay comentarios:

Publicar un comentario