martes, 9 de junio de 2015

Determinación sérica del grupo AB0 (27-04-15)



Justificación de la técnica y metodología utilizada

El suero de un individuo solo debe contener Ac frente a los Ag que no están presentes en sus propios hematíes. Por ello, al hacer reaccionar este suero con hematíes conocidos del grupo A y del grupo B, solo producirá aglutinación en el caso de ser enfrentados a eritrocitos con Ag distintos a los de sus propios hematíes
.
Identificación de la muestra utilizada y de los controles efectuados

La muestra que se utiliza en esta práctica es suero, aunque nosotros hemos utilizado plasma

Material utilizado

Material
·         - Tubos de ensayo
·          -   Pipetas Pasteur
·          -   Vasos de precipitados
·          - Centrifuga
- Reactivos
·          -   Suero fisiológico

Secuenciación y procedimiento seguido

1        1ºSe centrifuga la sangre y se le retira el plasma 

2        2ºEl plasma debe ser inactivado a 56 ºC durante 10 min en el caso de utilizar plasma en la practica

3        3ºSe hacen tres lavados de hematíes a esa sangre que ha quedado en el tubo después de centrifugar y se hace una suspensión de hematíes al 5%, para hacer la suspensión se cogen 250 microlitros de hematíes lavados y se echan en un tubo con 4,75 ml de suero fisiológico.

4    4º Se hace una suspensión de hematíes con cada grupo sanguíneo

5    5ºSe rotulan 5 tubos de centrifuga (A1, A2, B, 0 Y C)

6ºSe le añade a cada uno de esos tubos dos gotas de plasma problema y 1 gota de sus suspensión correspondiente. El tubo C lleva suspensión de sangre problema.

Se agitan suavemente y se centrifugan 1 min a 1000 rpm

8        8ºSe observan 

Descripción y registro de los resultados obtenidos

El grupo eritrocitario que se asignara, según los resultados obtenidos, se puede ver en el siguiente cuadro:




Tubo A1
Tubo A2
Tubo B
Tubo 0
Tubo C
Ac  presentes en el suero
Grupo eritrocitario
      -
      -
      +
     -
       -
 Anti - B
     A1
    - o + *
      -
      +
-           
       -
Anti – B y Anti – A1*
      A2
      +
      +
      -
-           
       -
Anti – A
       B
      +
      +
      +
     -
       -
Anti – A y Anti – B
       0
       -
      -
      -
     -
       -
Ninguno
     A1B
   - O +
      -
      -
     -
       -
Ninguno o Anti – A1
     A2B
      +
      +
      +
     +
       +
 Anticuerpos
Ininterpretable

+ = Aglutinación     
- = No Aglutinación
* = Este Anti A1 se encuentra solo en un 2% de los individuos A2



El resultado que he obtenido es el siguiente:

Tubo A1 –> Aglutinación

Tubo A2 --> Aglutinación

Tubo B --> Aglutinación

Tubo 0 --> No aglutinación

Tubo C --> No aglutinación

Por lo tanto según la tabla el resultado corresponde al grupo sanguíneo 0

Aplicación del control de calidad 

Para poder realizar un estudio correcto en esta práctica, los hematíes han de estar bien lavados. En caso de estar el sobrenadante coloreado, significa que ha habido hemólisis, por lo que debemos de comenzar de nuevo con el lavado de hematíes.
Para utilizar correctamente la centrífuga, los tubos a utilizar han de ser todos del mismo tamaño y en número par, para poder equilibrar la centrífuga.
Seguir correctamente las indicaciones de utilización de la centrífuga marcados en la práctica.


Normas de prevención de riesgos laborales
               1.      Uso de guantes y bata en el laboratorio.
               2.      Llevar el pelo recogido si se tiene largo.
               3.      No comer, beber o fumar en el laboratorio.
               4.      Uso correcto de la centrifugadora.
               5.      Lugar de trabajo limpio y ordenado.

Cuidado del medio ambiente

Lavar bien los tubos

Observaciones, comentarios y conclusiones

Es difícil confirmar el grupo sanguíneo por esta técnica en el caso de los recién nacidos, ya que sus anticuerpos no están bien desarrollados aun. También encontramos dificultades en los pacientes con gammaglobulinemia, ya que carecen de anticuerpos, y en aquellos que poseen unos anticuerpos específicos o inespecíficos capaces de reaccionar con los antígenos del grupo AB0

Hoja de trabajo 

1º ¿Qué son los hematíes tipados?

Son los hematies lavado con suero fisiologico

2º ¿A que dilución empleamos los hematíes del paciente?

Empleamos una dilución del 5%

3º ¿Qué clase de muestra se emplea en esta técnica?

Suero obtenido mediante coagulación de la sangre

4º ¿Qué ocurre cuando el tubo C presenta aglutinación?

Cuando el tubo C presenta aglutinación se deberia repetir las pruebas con otro lavado de hematies ya que el tubo C debe ser un control negativo

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